单元载体亚细胞定位,亚细胞定位载体构建
作者:hacker | 分类:黑客大神 | 浏览:132 | 日期:2022年07月13日目录：
如何分析蛋白质的亚细胞定位
如何分析蛋白质的亚细胞定位
预测蛋白质的亚细胞定位，是通过生物信息学的 *** 的。
或者你在NCBI数据库中比对到了编码类似蛋白的基因，如果该基因有人做过亚细胞定位的实验，你也可以大概知道其编码的蛋白质在细胞内部的定位。不同物种，不同基因家族成员有可能有区别。最终还是需要实验来验证的。
功能基因研究中，经常会进行基因编码的蛋白质的亚细胞定位的，
如待定位蛋白和GFP、YFP、RFP等融合后，观察融合蛋白在细胞内的定位，
或者将预测部位（如该蛋白可能在液泡膜上）的蛋白提取出来，进行western实验，来验证等。
亚细胞定位问题
亚细胞定位是指某种蛋白或表达产物在细胞内单元载体亚细胞定位的具体存在部位。如仅在核内存在，还是胞质内存在，还是细胞膜上存在。
gfp实际是给你要研究的物质加上标记。使用gfp必须构建融合蛋白载体，并有效表达。这样在荧光显微镜下，如果看到细胞内某一部位存在gfp信号，则说明和gfp融合的蛋白也存在于该部位，这样就达到单元载体亚细胞定位了确定某物质亚细胞定位的目的。
关于亚细胞定位、跨膜结构、信号肽 急救啊！~·`~
应该是 *** 白吧，有一些进细胞核的蛋白质通过核孔也需要信号肽
怎么亚细胞定位分析
用报告基因技术呀 比如说最常用的绿色荧光蛋白GFP或者改造过的EGFP等.和目的基因构建成为融合蛋白,转入细胞中以后,用激光扫描共聚焦显微镜就可以观察到基因的亚细胞定位
亚细胞定位用gfp号还是yfp好
YFP和GFP其实是序列基本相同的两种蛋白
GFP就是绿色荧光蛋白，YFP就是Thr203以Tyr取代，发出黄色的荧光，成为黄色荧光蛋白
因此两者更大的区别则是发射波长了
亚细胞定位用YFP或者GFP都是可以的
需要考虑：
如果是标记在N端很可能影响定位
如果是红色的探针，选用绿色GFP比较经典，两者叠合的橙色也是很多文献上常采用的。但如果是蓝色的探针，则选用黄色YFP比较容易区分一点
